Instrumento para la pesquisa de los problemas del desarrollo psicomotor en niños menores de seis años / Instrument for the screening of psychomotor development's problems in children under six years old

Introducción: En la detección temprana de los problemas del desarrollo resulta importante emplear instrumentos de pesquisa. Objetivo: Describir el diseño de un instrumento para la pesquisa de los problemas del desarrollo psicomotor en niños menores de seis años. Métodos: Investigación de desarrollo realizada en La Habana, en niños sanos menores de seis años (n=1 333). El instrumento se diseñó a partir de la estimación de las edades de cumplimiento de un conjunto de pautas de desarrollo. Se estimaron los percentiles 25, 50, 75 y 90 (± IC95 por ciento) de la edad de cumplimiento de 80 pautas del desarrollo psicomotor mediante una regresión logística con transformación inversa. Se comparó el percentil 50 con el de las pautas de otras pruebas similares. El instrumento se diseñó con un método gráfico con el programa Microsoft Excel 2010. Resultados: Se estimaron todos los percentiles en 93,8 por ciento de las pautas seleccionadas; en tres de ellas no fue posible obtener el percentil 25, el 50 o ambos y en dos casos fueron cumplidas por todos los niños, por lo que su comportamiento no fue acorde a un modelo madurativo. En las comparaciones respecto a pruebas foráneas predominaron las pautas cumplidas a edades similares y adelantadas. Conclusiones: El instrumento diseñado constituye una herramienta útil para la pesquisa de los problemas del desarrollo psicomotor en la primera infancia, tanto en la práctica asistencial como en estudios epidemiológicos. Su aplicación en estos escenarios contribuye a elevar la calidad de la atención pediátrica(AU)

Introduction: In the early detection of development problems, it is important to use screening instruments. Objective: To describe the design of an instrument for the screening of psychomotor development's problems in children under six years old. Methods: Development research conducted in Havana, in healthy children under six years old (n= 1 333). The design of instrument was based on the estimation of the ages of compliance related to a set of development guidelines. The 25th, 50th, 75th and 90th percentiles (± 95 percent CI) of the compliance age of 80 psychomotor development patterns were estimated by means of a logistic regression with inverse transformation. The 50th percentile was compared with that of other similar tests. The instrument was designed with a graphical method with Microsoft Excel 2010 program. Results: All percentiles were estimated in 93.8 percent of the selected guidelines; in three of them it was not possible to obtain the 25th percentile, the 50th or both, and in two cases they were fulfilled by all the children, so their behavior was not according to a maturational model. In the comparisons with respect to foreign tests, the patterns fulfilled at similar and advanced ages prevailed. Conclusions: The instrument designed is a useful tool for the investigation of psychomotor development problems in early childhood, both in care practice and epidemiological studies, and their application in these scenarios contributes to raising the quality of pediatric care(AU)

Validação de uma técnica para a detecção de acréscimo de amido em amostras de açaí in natura / Validation of a technique for the detection of addition of starch in samples of açaí in natura

O trabalho visou validar a utilização do teste de lugol para a detecção de fraude por composto amiláceo e papel em amostras de açaí. Para tal, diferentes produtos foram adicionados e diluídos em água e açaí, respectivamente. A padronização em água mostrou-se efetiva para os produtos amiláceos, havendo falha no método em açaí, exceto para o amido de milho, carecendo-se de mais estudos que levem em consideração as diversas particularidades do fruto.

HER2 e carcinomas gástricos: padrão de expressão e metodologias para detecção / HER2 and gastric carcinomas: expression pattern and methodologies for detection

O carcinoma gástrico (CG) representa um sério problema de saúde, sendo a segunda causa de morte relacionada ao câncer no mundo. No Brasil, é o quarto tipo de câncer mais comum entre os homens e o quinto mais comum entre as mulheres. O gene HER2 é um proto-oncogene localizado no cromossomo 17, codifica uma proteína transmembrana que pertence a família dos receptores HER e possue atividade tirosina quinase envolvida em vias de sinalizações relacionadas ao crescimento celular e diferenciação. Alterações no gene HER2 têm sido associadas com o desenvolvimento e progressões de várias neoplasias humanas. Em câncer de mama, a amplificação do HER2 é observada em cerca de 20% dos casos e o tratamento desses casos com o trastuzumabe, um anticorpo monoclonal, tem sido bastante efetivo. Em CG, a amplificação do HER2 tem sido observada em uma freqüência de 7% a 34% dos casos. Esta variabilidade é associada as diferentes metodologias utilizadas para a avaliação da expressão e/ou amplificação do HER2. Os resultados do estudo clinico ToGA mostrararm um aumento considerável nas taxas de sobrevida dos pacientes com CG avançados tratados com trastuzumabe e quiomioterapia comparado aqueles que foram tratados somente com quimioterapia. A correta identificação e seleção dos casos que irão se beneficiar desta terapia é o primeiro e mais importante passo para o sucesso do tratamento. O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão proteica e o número de cópias do gene HER2 em 762 CG de pacientes submetidos a ressecção cirúrgica no A.C. Camargo Câncer Center...

Gastric carcinoma (GC) is a serious health problem and is the second leading cause of cancer-related death in the world. In Brazil, it is the fourth most common cancer among men and the fifth most common among women. The HER2 gene is a protooncogene located on chromosome 17, encodes a transmembrane protein which belongs to the HER family of receptors and has tyrosine kinase activity involved in signaling pathways related to cell growth and differentiation. Alterations in HER2 gene have been associated with the development and progression of many human cancers. In breast cancer, amplification of HER2 is observed in approximately 20% of cases, and these treatment of these cases with trastuzumab, a monoclonal antibody, has been quite effective. In GC, the amplification of HER2 has been observed at a frequency of 7% to 34% of cases. This variability is associated with the different methodologies used to evaluate the expression and / or amplification of HER2. The results of the clinical study ToGA showed a considerable increase in patient survival rates with advanced CG treated with trastuzumab and chemotherapy compared those treated with chemotherapy alone. The correct identification and selection of the cases that will benefit from this therapy is the first and most important step to successful treatment. The aim of this study was to evaluate the protein expression and the number of copies of the HER2 gene in 762 GC patients undergoing surgical resection at AC Camargo Cancer Center (São Paulo, Brazil) using the methods of immunohistochemistry and in situ hybridization (FISH and DDISH ) compared: different clones and manufacturers of anti-HER2 primary antibodies (4B5-Ventana clone, SP3-Neomarkers...

PCR em tempo real para detecção do vírus da doença de Aujeszky / Real time PCR for detection of Aujeszky's disease virus

O objetivo deste trabalho foi desenvolver uma PCR em tempo real (qPCR) para o diagnóstico rápido e sensível da doença de Aujeszky. Os iniciadores amplificaram um fragmento de 123 pares de base do gene codificante da glicoproteína D. A qPCR foi testada em 25 amostras de cérebro de suíno positivas e 85 amostras negativas para DA no isolamento viral e na soroneutralização. A sensibilidade analítica foi calculada com acréscimo de um isolado brasileiro do SuHV-1 titulado em amostras de cérebro de suíno negativas na soroneutralização e na PCR. A técnica apresentou sensibilidade analítica de 10-0,5 TCID50/50µL. A qPCR foi capaz de distinguir reações inespecíficas devido a dímero de oligonucleotídeos iniciadores ou amplificações, além do alvo designado (evitando, assim, os falso-positivos), e de obter resultados rápidos.

The aim of this study was to validate a low-cost real-time PCR for a quick and sensitive diagnosis of the disease. The fluorofore used was a DNA intercalating agent, one of the cheaper detection systems. Primers amplified a 123 base pairs fragment of the gene coding for glycoprotein D. PCR was tested on 25 samples of pig brain positive for AD and 85 samples negative in viral isolation and serum neutralization. The detection limit was calculated on samples of pig brain contaminated with a Brazilian isolate of SuHV-1. The technique had a detection limit of 10-0,5 TCID50/50µL. PCR was able to distinguish nonspecific reactions due to primer dimers (thus avoiding false positives) and get faster results.

Cuidados de enfermagem a pacientes com Síndrome de West / Nursing care for patients carriers of West Syndrome

Objetivo: compreender a síndrome em debate para elaboração de cuidados ampliados na área da enfermagem pediátricapretendendo fornecer uma atenção direcionada as crianças portadoras da doença. Método: trata-se de um ensaio teóricofundamentado em uma revisão bibliográfica do tipo narrativa, que permite a análise da literatura publicada, artigos derevista impressas e/ou eletrônicas sobre um determinado assunto, com o objetivo de descrevê-lo e discuti-lo, sob ponto devista teórico ou contextual. Resultados: ao término da construção do referencial teórico da síndrome de West, pode-seperceber que a implementação da Sistematização da Assistência de Enfermagem (SAE) era algo imprescindível para aamenização e diminuição do agravo dos sintomas causados pela síndrome de West (SW). Os diagnósticos de enfermagem quepodem ser adotados nos casos de SW são: Mobilidade Física Prejudicada; Risco para lesão; Confusão crônica; Risco parainfecção; Ansiedade Relacionada à morte. Conclusão: a (SAE) é considerada uma estratégia de amplo aspecto quando sefala em assistência integral a esse paciente, e para o portador de SW, a SAE será de grande valia para controle e diminuiçãodos agravos gerados pelos sinais e sintomas.

Determination of apramycin in oral soluble powder by a HPLC method using pre-column derivatization with o-phthalaldehyde and UV detection / Determinação da apramicina em pó solúvel oral por um método de HPLC utilizando pré-coluna de derivação com o de detecção de ftalaldeído e UV

A high-performance liquid chromatographic method employing pre-column derivatization with o-phthalaldehyde (OPA) and 2-mercaptoacetic acid was developed for the determination of apramycin, an aminoglycoside antibiotic used in veterinary medicine, in the oral soluble powder form. The chromatographic separation was done by ion-pair HPLC using a C18 reversed-phase column, Synergy Hydro (150 mm x 4.6 mm x 4 µm) and mobile phase composed of 0.005 mol/L sodium octanosulfonate in a mixture of acetonitrile: water: acetic acid (45:55:2) (v/v/v) with a flow rate of 1.0 mL/min; the UV detector was operated at 332 nm. The developed method was validated according to official compendia guidelines, having demonstrated robustness, selectivity and linearity for the concentration range of 0.02 to 0.05 mg/mL, precision (with RSD < 2.0 percent both for intra and inter-day precision) accuracy (average recuperation of 99.33 percent) and detectivity (quantification and detection limits of 0.08 and 0.02 µg/mL, respectively). Three batches of commercial apramycin oral soluble powder were analyzed by both the proposed method and the official microbiological method, where all the results obtained were in the acceptable range (95 percent to 105 percent of labeled value of apramycin). Both methods were statistically compared by the t test, which yielded no significant differences (α = 0.05) thereby confirming the equivalence of the methods.

Foi desenvolvido um método por cromatografia líquida alta eficiência empregando derivatização pré-coluna com o-ftalaldeído (OPA) e ácido mercaptoacético para determinação de apramicina, um antibiótico aminoglicosídeo de uso veterinário, em pó oral solúvel. A separação cromatográfica foi feita por fase reversa com pareamento iônico utilizando-se coluna Synergy Hydro C18 (150 x 4,6 mm x 4 µm) e fase móvel composta por octanossulfonato de sódio 0,005 mol/L em mistura de acetonitrila:água:ácido acético nas proporções 45:55:2 (v/v/v), numa vazão de 1.0 mL/min; efetuou-se detecção por UV a 332 nm. O método foi validado de acordo com os compêndios oficiais e demonstrou robustez, seletividade, linearidade na faixa de 0,02 a 0,05 mg/mL, precisão (com DPR < 2,0 por cento tanto para a precisão intra-dia quanto para a precisão inter-dia), exatidão (recuperação média de 99,33 por cento) e detectabilidade (limite de quantificação e de detecção iguais a 0,08 e 0,02 µg/mL, respectivamente). Analisaram-se 3 lotes de apramicina pó oral solúvel pelo método proposto e pelo método microbiológico oficial e todos os resultados obtidos estavam dentro do limite de aceitação (95 por cento-105 por cento valor rotulado de apramicina). Ambos os métodos foram comparados estatisticamente pelo teste t, não sendo encontradas diferenças significativas entre eles para α=0,05, sendo os dois equivalentes.

Determination of moisture content in lyophilized mannitol through intact glass vials using NIR micro-spectrometers / Determinação do teor de umidade em manitol liofilizado através de frascos de vidro intactas usando micro-espectrômetros NIR

Determination of moisture content in lyophilized solids is fundamental to predict quality and stability of freeze-dried products, but conventional methods are time-consuming, invasive and destructive. The aim of this study was to develop and optimize a fast, inexpensive, noninvasive and nondestructive method for determination of moisture content in lyophilized mannitol, based on an NIR micro-spectrometer instead of a conventional NIR spectrometer. Measurements of lyophilized mannitol were performed through the bottom of rotating glass vials by means of a reflectance probe. The root mean standard error of prediction (RMSEP) and the correlation coefficient (R²pred), yielded by the pre-treatments and calibration method proposed, was 0.233 percent (w/w) and 0.994, respectively.

A determinação do conteúdo de umidade em sólidos liofilizados é fundamental para se prever a qualidade e a estabilidade de produtos liofilizados, mas os métodos convencionais consomem muito tempo, são invasivos e destrutivos. O objetivo desse estudo foi desenvolver e otimizar um método rápido, econômico, não invasivo e não destrutivo para a determinação do conteúdo de umidade em manitol liofilizado, com base em microespectrômetro de infravermelho próximo ao invés de um espectrômetro de infravermelho próximo convencional. As medidas de manitol liofilizado foram realizadas através do fundo de recipiente de vidro em rotação por meio de sonda de reflectância. A raíz do erro médio padrão de predição (RMSEP) e o coeficiente de correlação (R²pred) obtidos pelo prétratamento e pelo método de calibração proposto foram, respectivamente, 0,233 por cento (p/p) e 0,994.

Polymerase chain reaction and blood culture in blood donors screened by ELISA test for Chagas' disease / Reação em cadeia da polimerase e da cultura de sangue em doadores de sangue selecionados pelo teste de ELISA para doença de Chagas

The objective of this study was to evaluate, through blood culture and PCR, the results of the ELISA for Chagas' disease in the screening of blood donors in the public blood-supply network of the state of Paraná, Brazil, and to map the epidemiological profile of the donors with respect to their risk of infection by Trypanosoma cruzi. The negative and positive results of the ELISA were confirmed by blood culture and PCR for 190/191 individuals (99.5 percent). For one individual (0.5 percent), the ELISA was inconclusive, blood culture and IIF were negative, and IHA and PCR positive. Three individuals (1.6 percent) were positive for T. cruzi on all the tests. Donors were predominantly female, and natives of Paraná, of rural origin, had observed or been informed of the presence of the vector in the municipalities where they resided, had never received a blood transfusion, had donated blood 1 to 4 times, and reported no cases of Chagas' disease in their families. We concluded that PCR and blood culturing have excellent potential for confirming the results of the ELISA, and that candidate blood donors with negative or positive tests have a similar risk of infection by T. cruzi, indicating that the ELISA test is sufficiently safe for screening blood prior to use.

O objetivo deste estudo foi avaliar, pela hemocultura e PCR, os resultados do teste ELISA utilizado para doença de Chagas na triagem de doadores de sangue na rede pública do Estado do Paraná, Brasil, e traçar o perfil epidemiológico dos doadores quanto ao risco de infecção pelo Trypanosoma cruzi. Os resultados negativos e positivos do ELISA foram confirmados pela hemocultura e PCR em 190/191 indivíduos (99,5 por cento). Para um indivíduo (0,5 por cento), o teste de ELISA foi inconclusivo, hemocultura e IFI foram negativas, HAI e PCR foram positivas. Três indivíduos (1,6 por cento) foram positivos para T. cruzi em todos os testes. A maioria dos doadores era do sexo feminino, oriundos do Estado do Paraná, de origem rural, tinham observado ou foram informados da presença do vetor nos municípios onde residiam, nunca tinham recebido sangue, haviam doado sangue de 1 a 4 vezes e não relataram casos de doença de Chagas na família. Nós concluímos que a PCR e a hemocultura são excelentes testes para confirmar os resultados do ELISA e os candidatos a doadores de sangue com testes positivos e negativos apresentam risco semelhante de infecção pelo T. cruzi, reforçando o nível satisfatório de segurança do teste ELISA para liberar o sangue para o uso.

Desenvolvimento de micobacteriófago recombinante para detecção rápida de bacilos da tuberculose / Development of recombinant micobacteriophage for rapid detection of tubercle bacillus

O diagnóstico da tuberculose por métodos tradicionais é lento e laborioso. Por outro lado, os testes moleculares são rápidos, mas com custo elevado para países em desenvolvimento. Este projeto teve o objetivo de inserir no micobacteriófago D29 o gene que codifica a proteína verde fluorescente (eGFP) e estudar o fago recombinante na detecção rápida de bacilos da tuberculose. Para tanto, foi inserido o cassete Hsp60- eGFP no genoma do fago D29 por recombinação. Micobacteriófagos recombinantes purificados foram utilizados para infectar M. smegmatis mc2 155 e M. tuberculosis H37Rv durante um período de 1- 6h nas temperaturas de 30°C, 37°C e 42°C. Bactérias fluorescentes foram observadas em um período de 2h, mas em número reduzido, indicando que o micobacteriófago lisou às células rapidamente, dificultando a expressão da eGFP e visualização em microscópio de fluorescência. A deleção do gene LysA, foi efetuada a fim de aumentar o período de latência do fago. Não foi possível a purificação de fagos recombinantes, devido à baixa quantidade de recombinantes nos halos de inibição. Será necessário a redução da atividade o gene LysA e, provavelmente, de outros genes associados a lise celular a fim de aumentar a concentração de eGFP no interior da célula.

Classical biochemical methods for Mycobacterium tuberculosis identification are lengthy and time-consuming. On the other hand, molecular assays are rapid but expensive for developing countries. This project aimed to insert into the mycobacteriophage D29, the gene coding for the green fluorescent protein (eGFP) and use the recombineered phage to detect Mycobacterium tuberculosis rapidly and less costly. For that, the Hsp-eGFP cassette was inserted into D29 genome. Recombineered mycobacteriophages was purified and used to infect M. smegmatis mc2 155 and M. tuberculosis H37Rv from 1-6 hs at 30°C, 37°C and 42°C. Observation of fluorescent bacteria was difficult and only a small number of them were seen at 2 hs of infection. This indicated that recombineered bacteriophages were lysing cells rapidly. Deletion of LysA gene, was carried out to increase the time needed for bacterial lysing. it was not possible to purify mutant mycobacteriophages due to the low concentration of recombinant phages. We conclude that might be necessary the deletion of other genes such as LysB, a gene also involved in cell lysis and reduction LysA activity to increase the concentration of eGFP inside cells.

Determination of nimodipine in plasma by HPLC-MS/MS and pharmacokinetic application

To develop and validate a rapid, specific and highly sensitive method to quantify nimodipine in human plasma using dibucaine as the internal standard (IS). The analyte and IS were extracted from plasma samples by liquid-liquid extraction using hexane-ethyl acetate (1:1 v/v). The chromatographic separation was performed on a Varian® Polaris C18 analytical column (3 μm, 50 x 2.0 mm) and pre-column SecurityguardTM C18 (4.0 x 3.0 mm) with a mobile phase of Acetonitrile-Ammonium acetate 0.02 ml/L (80:20v/v). The method had a chromatographic run time of 4.5 min and linear calibration curve over the range of 0.1- 40 ng/mL (r > 0.9938). The limit of quantification was 100 pg/mL. Acceptable precision and accuracy were obtained for concentrations over the standard curve ranges. This validated method was successfully applied in determining the pharmacokinetic profile of nimodipine tablets of 30 mg administered to 24 healthy volunteers. The proposed method of analysis provided a sensitive and specific assay for nimodipine determination in human plasma. The time for the determination of one plasma sample was 4.5 min. This method is suitable for the analysis of nimodipine in human plasma samples collected for pharmacokinetic, bioavailability or bioequivalence studies in humans.

Um método rápido, específico e sensível para quantificar nimodipino em plasma humano usando dibucaína como padrão interno (IS) é descrito. O analito e o IS foram extraídos das amostras de plasma por extração líquido-líquido usando hexano-acetato de etila (1:1 v/v). A separação cromatográfica foi realizada utilizando-se uma coluna analítica C18 Varian® Polaris (3 μm, 50 x 2,0 mm) e uma pré-coluna SecurityguardTM C18 (4,0 x 3,0 mm) e acetonitrila-acetato de amônia 0,02 mol/L (80:20 v/v) como fase móvel. O método apresentou tempo total de corrida de 4,5 min e curva de calibração linear com concentrações entre 0,1-40 ng/mL (r > 0,9938). O limite de quantificação foi de 100 pg/mL. Os valores de precisão e exatidão foram obtidos por meio da análise das amostras de controle de qualidade. A análise de uma única amostra de plasma foi realizada em 4,5 minutos. A metodologia validada foi aplicada na determinação do perfil farmacocinético do nimodipino, comprimido de 30 mg administrado em 24 voluntários saudáveis. O método para quantificar nimodipino em plasma é adequado para aplicação em estudos farmacocinéticos, biodisponibilidade e bioequivalência em humanos.

Determination of carbamazepine in pharmaceutical formulations / Determinação de carbamazepina em formulações farmacêuticas

The aim of this study was to evaluate the quality of five different solid formulations of carbamazepine. The reference formulation was Tegretol® 200.00 mg (Novartis) and the others were: generic formulation of carbamazepine 200.00 mg (National Industry), similar formulation of carbamazepine 200.00 mg (National Industry), and two formulations of carbamazepine 200.00 mg acquired from two different compounding pharmacies. The latter consisted of capsules obtained in Natal, the capital city of the Brazilian State of Rio Grande do Norte. The quality of samples was evaluated through physical and physical-chemical tests, including: weight, diameter, thickness, content, dissolution, disintegration, hardness, friability and moisture. The results of friability analysis showed that all formulations met Brazilian and United States Pharmacopeia (USP) specifications. In spite of having a higher hardness compared to the reference, the generic formulation had a lower disintegration time. This could be associated to the presence of crospovidone in its formulation. Results of this study showed that all formulations had dissolutions which were in accordance with Brazilian Pharmacopoeia specifications, and quality control tests. An exception was found for the similar formulation, which had a hardness parameter that exceeded the USP standard. However, this difference was not significant given the similar formulation's satisfactory disintegration time.

O objetivo desse trabalho foi avaliar a qualidade de cinco formulações de carbamazepina na dosagem de 200,00 mg: medicamento referência Tegretol® (Novartis), medicamento genérico (indústria nacional), medicamento similar (indústria nacional) e cápsulas do mesmo medicamento obtidas de duas farmácias de manipulação da cidade do Natal, RN. Os ensaios realizados foram: peso médio, diâmetro, espessura, teor, dissolução, desintegração, dureza, friabilidade e umidade. Foi observado que nenhuma das amostras analisadas apresentou friabilidade superior ao limite máximo determinado pela Farmacopéia Americana (1,5 por cento). O medicamento genérico, apesar de apresentar dureza superior em relação ao medicamento de referência, desintegrou em menor tempo, o que pode estar relacionado à crospovidona presente na formulação. As amostras analisadas atenderam às especificações da Farmacopéia Brasileira no que diz respeito à dissolução. Em geral, os resultados das amostras A, B, C, D e E foram considerados satisfatórios uma vez que atenderam as especificações farmacopéicas. Embora a apresentação similar não tenha atendido ao padrão USP no que diz respeito à dureza, esse dado não se mostrou significativo, uma vez que o tempo de desintegração foi satisfatório.

Sarcoma de kaposi: clasificación y evaluación en Zimbabwe / Kaposi's sarcoma: classification and evaluation in Zimbabwe

Se realizó estudio prospectivo longitudinal con los pacientes diagnosticados de sarcoma de Kaposi (SK), quienes fueron atendidos en la consulta especializada para esa entidad en el hospital Parirenyatwa de Harare, Zimbabwe entre 2005 y 2006, a los que se les recogieron variables como edad, sexo, resultado de biopsia de piel, prueba de VIH, tiempo de detección de la enfermedad y estadios en que se encontraban. Se encontró que el sexo más afectado fue el masculino con 63,5 por ciento de los pacientes, 87,9 por ciento tenían menos de 16 meses de detección de la enfermedad. 93 por ciento de los pacientes se encontraban en los estadios 3 y 4 de la enfermedad, 95,3 por ciento de los pacientes se clasificaron como SK epidémico y endémico solo 2,6 por ciento; la relación masculino: femenino fue de 8:1 en el SK endémico. 77,1 por ciento de los pacientes con SK epidémico tenían entre 25 y 44 años y 59 por ciento de los endémicos tenían más de 55 años(AU)

A prospective and longitudinal study was done among the patients diagnosed of suffering Kaposi's Sarcoma (KS). They were treated in specialized consultation for this disease in Parirenyatwa Hospital of Harare, Zimbabwe between 2005 and 2006. To whom were collected different variables such as age, sex, skin biopsy result, HIV test, time of detection and stages of this disease. Finding that sex more affected was masculine with 63,5 percent of patients, 87,9 percent of patients had a time of detection were less than 16 months, 93 percent of patients were found between 3 and 4 stage of this disease, 95,3 percent were classified as epidemic KS and 2,6 percent endemic KS, ratio male-female was 8:1 in endemic KS and 77,17 percent of patients with epidemic KS were between 25 and 44 years and 59 percent of endemic KS were more then 55 years(AU)

Teste imunoenzimático com base em anticorpo monoclonal para a detecção de anticorpos contra os herpesvírus bovino tipos 1 e 5 / A monoclonal antibody-based enzyme-linked immunosorbent assay for detection of antibodies to bovine herpesvirus types 1 and 5

Os herpesvírus bovino tipos 1 (BoHV-1) e 5 (BoHV-5) são agentes virais genética e antigenicamente relacionados, associados com diversas manifestações clínicas em bovinos, incluindo doença respiratória, genital, neurológica e abortos. Estudos epidemiológicos indicam que esses vírus estão amplamente disseminados no rebanho bovino brasileiro. O diagnóstico sorológico, que permite identificar animais portadores da infecção latente, se constitui em importante ferramenta para monitoramento individual e de rebanho. O presente artigo relata a padronização de um teste imunoenzimático do tipo ELISA, com base em anticorpo monoclonal (AcM), para a detecção de anticorpos séricos que reagem contra BoHV-1 e/ou BoHV-5. Inicialmente, determinou-se o AcM mais adequado para a sensibilização das placas, as diluições apropriadas do antígeno e dos soros-teste e o ponto de corte do ensaio. Após a padronização, o ensaio foi validado testando-se 506 amostras de soro bovino, previamente testadas para anticorpos neutralizantes contra BoHV-1 e/ou BoHV-5 pela técnica de soroneutralização (SN). Comparando-se com os resultados da SN frente a BoHV-1, o teste de ELISA apresentou sensibilidade e especificidade de 96,6 por cento e 98,3 por cento, respectivamente. Os valores preditivos positivo e negativo foram de 97,6 por cento, a concordância foi de 97,6 por cento e o índice de correlação kappa entre os testes foi de 0,95, o que indica uma excelente concordância. Comparando-se com os resultados da SN frente o BoHV-5, o ELISA apresentou 94,3 por cento de sensibilidade; 97,9 por cento de especificidade; 97,1 por cento de valor preditivo positivo e 95,9 por cento de valor preditivo negativo. Para BoHV-5, a concordância entre os testes foi de 96,4 por cento e o índice de correlação foi de 0,92, também excelente. Esses resultados demonstram que o teste padronizado apresenta sensibilidade e especificidade adequados para o diagnóstico sorológico das infecções por BoHV-1 e BoHV-5...

Bovine herpesviruses 1 (BoHV-1) and 5 (BoHV-5) are antigenic and genetically related viruses associated with different clinical syndromes in cattle, including respiratory, reproductive, neurological disease and abortion. Epidemiological studies indicate the widespread distribution of both viruses among Brazilian cattle. Serological diagnosis, that allows the identification of latently infected animals, represents an important tool for individual and herd monitoring. The present article describes the standardization of a monoclonal antibody (MAb)-based immunoenzymatic test (ELISA) for detection of antibodies to BoHV-1 and/or BoHV-5. The initial steps involved the determination of the most suitable MAb, the appropriate dilutions of viral antigen and serum samples, and the cut-off value of the assay. After standardization, the ELISA was validated by testing 506 cattle serum samples previously tested for neutralizing antibodies to BoHV-1 and BoHV-5 by virus neutralizing assay (VN). Comparing to the VN for BoHV-1 antibodies, the ELISA presented sensitivity and specificity of 96.6 percent and 98.3 percent, respectively. Positive and negative predictive values were 97.6 percent, the concordance between the tests was 97.6 percent and the coefficient of correlation k (kappa) was 0.95, demonstrating an excellent correlation. Comparing to the VN for BoHV-5 antibodies, the ELISA presented 94.3 percent of sensitivity, 97.9 percent of specificity, 97.1 percent of positive predictive value, 95.9 percent negative predictive value, concordance of 96.4 percent and kappa coefficient of 0.92. These results demonstrate that the ELISA presents suitable specificity and sensitivity to be used for individual and herd serological diagnosis of BoHV-1 and BoHV-5, thus, representing an alternative for VN assays and imported ELISA kits.

Development of a new analytical method for determination of acetylsalicylic and salicylic acids in tablets by reversed phase liquid chromatography / Desenvolvimento de um novo método analítico para determinação de ácidos salicílico e acetilsalicílico em comprimidos por cromatografia líquida de fase invertida

Acetylsalicylic acid (AAS) is a drug utilized as analgesic, anti-inflammatory, and antipyretic medication, available worldwide and commonly used in Brazil. Salicylic acid (AS) is a precursor in AAS synthesis and is also produced during its degradation. The official United States Pharmacopoeia (USP) suggests the determination of these drugs by high performance liquid chromatography (HPLC), with ultraviolet detection, but this method has neither a high sensitivity (S AAS=0.12 mAbs/(μg/mL) and S AS=0.48 mAbs/(μg/mL)) nor resolution (Rs=1.61). The purpose of this study was to develop a new more adequate, accurate method by liquid phase chromatography than the current official methodology, and to use this new method in the determination of the tenors of acetylsalicylic, as of salicylic acids in tablets. The parameters of the chromatographic system for both the AAS and AS were satisfactory. Selectivity was verified by absorption spectra comparison in the ultraviolet (UV) range, during and after substance retention time. The linear range for AAS was 0.21 to 0.39 mg/mL, and that for AS was 6.3 to 11.7 μg/mL. The correlation coefficients (r) of the analytical curves of AAS and AS were 0.9995 and 0.9988, respectively; and the detection and quantification limits for the AS were 0.23 and 0.69 μg/mL. The sensitivity (S AAS=1.88 mAbs/(μg/mL) and S AS=1.84 mAbs/(μg/mL)) and the resolution (Rs =5.06) show the improvement obtained using this method over that described by the USP.

O ácido acetilsalicílico (AAS) é um fármaco utilizado como analgésico, antiinflamatório, antipirético, sendo amplamente comercializado e consumido no Brasil e no mundo. Como precursor de sua síntese utiliza-se o ácido salicílico (AS) que também é produzido através de sua degradação. A metodologia oficial da Farmacopéia Americana (USP) preconiza a determinação destes fármacos por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção por ultravioleta, mas este método não possui boa sensibilidade (S AAS=0,12 mAbs/(μg/mL) e S AS=0,48 mAbs/(μg/mL)) e resolução (Rs =1,61). O objetivo deste trabalho, visando a melhor adequação do sistema cromatográfico em relação à metodologia oficial, foi o desenvolvimento e otimização de um novo método por cromatografia em fase líquida para determinar os teores tanto do ácido acetilsalicílico quanto do salicílico em comprimidos. Os parâmetros da adequação do sistema cromatográfico para o AAS e para o AS foram satisfatórios. A seletividade foi verificada por comparações dos espectros de absorção no ultravioleta (UV) antes, durante e depois do tempo de retenção da substância. A faixa linear de trabalho para o AAS foi de 0,21 a 0,39 mg/mL e a do AS foi de 6,3 a 11,7 μg/mL. Os coeficientes de correlação (r) das curvas analíticas do AAS e do AS foram de 0,9995 e 0,9988, respectivamente e os limites de detecção e quantificação para o AS foram 0,23 e 0,69 μg/mL. A sensibilidade (S AAS=1,88 mAbs/(μg/mL) e S AS=1,84 mAbs/(μg/mL)) e a resolução (Rs=5,06) atestam a melhoria em relação ao método descrito na USP.

Determination of olanzapine by spectrophotometry using permanganate / Determinação de olanzapina por espectrofotometria utilizando permanganato

Two new spectrophotometric methods using permanganate as the oxidimetric reagent for the determination of olanzapine (OLP) were developed and validated as per the current ICH guidelines. The methods involved the addition of known excess of permanganate to OLP in either acid or alkaline medium followed by the determination of unreacted permanganate at 550 nm (method A) or bluish-green color of manganate at 610 nm (method B). The decrease in absorbance in method A or increase in absorbance in method B as a function of concentration of OLP was measured and related to OLP concentration. Under optimized conditions, Beer's law was obeyed over the ranges 2.0 to 20 and 1.0 to 10 μg mL-1 in method A and method B, respectively. The calculated molar absorptivity values were 1.34 x 10(4) and 2.54 x 10(4) l mol-1cm-1 for method A and method B respectively, and the respective Sandell sensitivities were 0.0233 and 0.0123 μg cm-2. The LOD and LOQ for method A were calculated to be 0.37 and 1.13 μg mL-1and the corresponding values for method B were 0.16 and 0.48 μg mL-1. Intermediate precision, expressed as RSD was in the range 0.51 to 2.66 percent, and accuracy, expressed as relative error ranged from 0.79 to 2.24 percent. The proposed methods were successfully applied to the assay of OLP in commercial tablets with mean percentage recoveries of 102 ±1.59 percent (method A) and 101 ±1.53 percent (method B). The accuracy and reliability of the methods were further confirmed by performing recovery tests via standard addition procedure.

Dois métodos espectrofotométricos novos, usando o permanganato como o reagente oxidimétrico para a determinação da olanzapina (OLP) foram utilizados e validados de acordo com as diretrizes atuais do ICH. Os métodos envolveram a adição de excesso conhecido de permanganato à OLP em meio ácido ou alcalino, determinando-se o permanganato que não reagiu em 550 nm (método A), ou pela cor verde-azulada do manganato a 610 nm (método B). A diminuição da absorbância no método A ou o aumento da absorbância no método B, em função da concentração de OLP, foi medida e relacionada à concentração de OLP. Sob condições otimizadas, a lei de Beer foi obedecida, nas faixas de concentração de 2,0 a 20 e 1,0 a 10 ao μg mL-1, no método A e no método B, respectivamente. Os valores de absortividade molar foram de 1,34 x 104 e 2,54 x 104 l mol-1cm-1 para o método A e para o método B, respectivamente, e as sensibilidades respectivas de Sandell foram de 0,0233 e 0,0123 μg cm-2. Os LOD e os LOQ para o método A calculados foram 0,37 e 1,13 μg mL-1e os valores correspondentes para o método B foram 0,16 e 0,48 μg mL-1. A precisão intermediária, expressa como RSD, encontrou-se na faixa de 0,51 a 2,66 por cento, e a exatidão, expressa como o erro relativo, variou de 0,79 a 2,24 por cento. Os métodos propostos foram aplicados com sucesso ao ensaio de OLP em comprimidos comerciais, com porcentagens médias de recuperação de 102± 1,59 por cento (método A) e de 101± 1,53 por cento (método B). A exatidão e a confiabilidade dos métodos foram confirmadas executando testes de recuperação através de procedimento padrão de adição.

Métodos para la detección de la infección por Helicobacter pylori / Techniques used for the Helicobacter pylori infection detection

Helicobacter pylori es una bacteria que infecta la mucosa gástrica de más del 50 por ciento de la población mundial y ha sido reconocida como el factor etiológico más importante en el desarrollo de diversas afecciones gástricas como gastritis, úlcera, cáncer gástrico y el linfoma del tejido linfoide asociado a la mucosa gástrica (linfoma MALT). Por el potencial patogénico de esta bacteria, resulta necesario contar con métodos eficaces para su detección. Las técnicas empleadas para el diagnóstico de la infección por Helicobacter pylori se dividen en 2 grupos: técnicas invasivas, que requieren una endoscopia gástrica para la toma de biopsias y técnicas no invasivas que son menos agresivas para el paciente. Esta revisión constituye una actualización de las principales técnicas empleadas en el diagnóstico de la infección por Helicobacter pylori, las cuales continúan en constante perfeccionamiento.

Helicobacter pylori is a bacterium affecting gastric mucosa in more than 50 percent of world population, and has been recognized as the most important etiologic factor in the development of many gastric pathologies including gastritis, ulcer, gastric cancer, and the gastric mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma (MALT lymphoma). Due to pathogenic potential of this bacterium, it is necessary to have effective methods for its detection. Techniques used for Helicobacter pylori infection detection are divided into two groups: invasive techniques, requiring a gastric endoscopy for biopsy obtention, and non-invasive techniques which are less aggressive for patient. This review is an updating of main techniques used in diagnosis of Helicobacter pylori infection, which are in a continuous improvement.

Métodos para la detección de la infección por Helicobacter pylori / Techniques used for the Helicobacter pylori infection detection

Helicobacter pylori es una bacteria que infecta la mucosa gástrica de más del 50 por ciento de la población mundial y ha sido reconocida como el factor etiológico más importante en el desarrollo de diversas afecciones gástricas como gastritis, úlcera, cáncer gástrico y el linfoma del tejido linfoide asociado a la mucosa gástrica (linfoma MALT). Por el potencial patogénico de esta bacteria, resulta necesario contar con métodos eficaces para su detección. Las técnicas empleadas para el diagnóstico de la infección por Helicobacter pylori se dividen en 2 grupos: técnicas invasivas, que requieren una endoscopia gástrica para la toma de biopsias y técnicas no invasivas que son menos agresivas para el paciente. Esta revisión constituye una actualización de las principales técnicas empleadas en el diagnóstico de la infección por Helicobacter pylori, las cuales continúan en constante perfeccionamiento(AU)

Helicobacter pylori is a bacterium affecting gastric mucosa in more than 50 percent of world population, and has been recognized as the most important etiologic factor in the development of many gastric pathologies including gastritis, ulcer, gastric cancer, and the gastric mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma (MALT lymphoma). Due to pathogenic potential of this bacterium, it is necessary to have effective methods for its detection. Techniques used for Helicobacter pylori infection detection are divided into two groups: invasive techniques, requiring a gastric endoscopy for biopsy obtention, and non-invasive techniques which are less aggressive for patient. This review is an updating of main techniques used in diagnosis of Helicobacter pylori infection, which are in a continuous improvement(AU)

La resistencia a antibióticos en Helicobacter pylori / The resistance to antibiotics in Helicobacter pylori

Se hizo una revisión sobre el tema de la resistencia a antibióticos en Helicobacter pylori dirigida a especialistas de la salud, particularmente a los gastroenterólogos. Se sabe que la actualización constante resulta una importante herramienta para combatir la infección por H. pylori y evitar el aumento de la resistencia del microorganismo a los antibióticos de elección en nuestro país. Se abordaron los mecanismos moleculares de acción de los antibióticos más empleados en las terapias erradicadoras (metronidazol, amoxicilina, tetraciclina y claritromicina); así como los genes del microorganismo involucrado en la resistencia a cada antibiótico. Se aportaron datos sobre otros antibióticos menos usados, como la levofloxacina y ciprofloxacina. Se incluyeron, además, los métodos más usados para detectar la resistencia de la bacteria a cada antibiótico.

A review on the topic of resistance to antibiotics in Helicobacter pylori directed to health specialists and, particularly, to gastroenterologists was made. It is known that the constant updating is an important tool to fight H. pylori infection and to prevent the increase of the resistance of the microorganism to election antibiotics in our country. The mollecular mechanisms of action of the antibiotics most commonly used in erradication therapies (metronidazole, amoxicillin, tetracycline and claritromicine), as well as the genes of the microorganism involved in the resistance to every antibiotic, were approached. Data on other less used antibiotics, such as levofloxacin and ciprofloxacin were given. The most used methods to detect the resistance of the bacterium to each antibiotic were also included.

Evaluación de la detección de casos de tuberculosis mediante un indicador sintético en dos municipios de Ciudad de La Habana / Assessment of the detection of tuberculosis cases by means of a synthetic indicator in two municipalities of Havana City

Valorar la factibilidad y los resultados de la aplicación de un indicador sintético, como evaluación de una intervención. Se realizó un estudio de intervención en 2 municipios de Ciudad de La Habana (10 de Octubre y Boyeros) y se seleccionaron 2 áreas de salud de cada uno. Se aplicó el indicador sintético de localización de casos (que integra las variables de selección de sintomáticos respiratorios, baciloscopias, demora de la primera consulta y de la investigación de contactos) de octubre de 2005 a marzo de 2006 y de octubre de 2006 a marzo de 2007. Después de la intervención de capacitación para médicos y enfermeras de la familia se aplicó el indicador sintético de localización de casos en las áreas seleccionadas del municipio Boyeros. Para el total de los 12 casos de tuberculosis de 10 de Octubre, el indicador sintético de localización de casos fue 0,32 (deficiente) y para los 11 de Boyeros fue 0,12 (deficiente) antes de la intervención y después de esta fue 0,72 (muy bueno) para el Salvador Allende y 0,62 (aceptable) para el Federico Capdevila. Los datos sugieren que el indicador sintético de localización de casos resultó coherente y consistente con la realidad sobre la calidad de la detección de casos y mostró una mejoría notable después de la intervención de capacitación.

To assess the feasibility and the results of the application of a synthetic indicator as an intervention evaluation. An interventional study was conducted in two municipalities of Havana City (10 de Octubre and Boyeros), and two health areas were selected in each one. The synthetic indicator of case localization (including variables of respiratory symptomatic cases, bacilloscopies, delay of first consultation, and contact investigation) was applied from October 2005 to March 2006 and from October 2006 to March 2007. After the training intervention for family physicians and nurses, the synthetic indicator of case localization was used in selected areas of Boyeros municipality. The synthetic indicator of case localization was of 0.32 (deficient) for the12 cases of tuberculosis of 10 de Octubre municipality, whereas it was 0,12 (deficient) for the 11 cases of Boyeros before the intervention. After the intervention, it was 0,72 (very good) for Salvador Allende and 0,62 (acceptable) for Federico Capdevila health centers. Data suggested that the synthetic indicator of case localization was coherent and consistent with reality as regards the quality of case detection. It showed also a significant improvement after the upgrading intervention.

Evaluación de la detección de casos de tuberculosis mediante un indicador sintético en dos municipios de Ciudad de La Habana / Assessment of the detection of tuberculosis cases by means of a synthetic indicator in two municipalities of Havana City

Valorar la factibilidad y los resultados de la aplicación de un indicador sintético, como evaluación de una intervención. Se realizó un estudio de intervención en 2 municipios de Ciudad de La Habana (10 de Octubre y Boyeros) y se seleccionaron 2 áreas de salud de cada uno. Se aplicó el indicador sintético de localización de casos (que integra las variables de selección de sintomáticos respiratorios, baciloscopias, demora de la primera consulta y de la investigación de contactos) de octubre de 2005 a marzo de 2006 y de octubre de 2006 a marzo de 2007. Después de la intervención de capacitación para médicos y enfermeras de la familia se aplicó el indicador sintético de localización de casos en las áreas seleccionadas del municipio Boyeros. Para el total de los 12 casos de tuberculosis de 10 de Octubre, el indicador sintético de localización de casos fue 0,32 (deficiente) y para los 11 de Boyeros fue 0,12 (deficiente) antes de la intervención y después de esta fue 0,72 (muy bueno) para el Salvador Allende y 0,62 (aceptable) para el Federico Capdevila. Los datos sugieren que el indicador sintético de localización de casos resultó coherente y consistente con la realidad sobre la calidad de la detección de casos y mostró una mejoría notable después de la intervención de capacitación(AU)

To assess the feasibility and the results of the application of a synthetic indicator as an intervention evaluation. An interventional study was conducted in two municipalities of Havana City (10 de Octubre and Boyeros), and two health areas were selected in each one. The synthetic indicator of case localization (including variables of respiratory symptomatic cases, bacilloscopies, delay of first consultation, and contact investigation) was applied from October 2005 to March 2006 and from October 2006 to March 2007. After the training intervention for family physicians and nurses, the synthetic indicator of case localization was used in selected areas of Boyeros municipality. The synthetic indicator of case localization was of 0.32 (deficient) for the12 cases of tuberculosis of 10 de Octubre municipality, whereas it was 0,12 (deficient) for the 11 cases of Boyeros before the intervention. After the intervention, it was 0,72 (very good) for Salvador Allende and 0,62 (acceptable) for Federico Capdevila health centers. Data suggested that the synthetic indicator of case localization was coherent and consistent with reality as regards the quality of case detection. It showed also a significant improvement after the upgrading intervention(AU)